Survivin是脑胶质瘤基因治疗的良好靶点

www.yongyao.net　　2006-11-22 10:08:49　　来源：　　责任编辑：

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最近，由第四军医大学西京医院全军神经外科研究所牵头，该校基础部实验动物中心和唐都医院全军骨科中心参与完成的一项国家自然科学基金资助项目证明，Survivin基因可作为脑胶质瘤基因治疗的一个良好靶点。

Survivin是凋亡蛋白抑制因子（IAP）家族中的一个新成员，它在包括胶质瘤在内的人类多种类型的恶性肿瘤中存在高表达，而在成人的正常组织中无表达或仅有低表达，因此近年来成为颇受注目的肿瘤治疗靶点之一。在前期工作中，研究人员采用RNA干扰（RNAi）技术，构建了针对人Survivin基因的特异性短发卡RNA（shRNA）真核表达载体，并证实稳定转染该表达载体可明显抑制人脑胶质母细胞瘤U251细胞Survivin基因mRNA和蛋白的表达，进而显著抑制U251细胞的体外生长和诱导瘤细胞发生大量凋亡。

为观察稳定转染靶向Survivin基因的shRNA真核表达载体对人脑胶质母细胞瘤U251细胞裸鼠体内肿瘤生长和血管形成的影响，研究人员将U251细胞（U251组），稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR的U251-SR细胞（U251-SR组），以及稳定转染空载体pWH1的U251-P细胞（U251-P组），分别接种于裸鼠背部皮下，建立人脑胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型，然后定期观察肿瘤生长情况，测定肿瘤体积，绘制肿瘤生长曲线，观察45天后处死动物，称瘤重。

结果发现，与U251组和U251-P组裸鼠相比，U251-SR组裸鼠肿瘤形成时间延迟，肿瘤生长缓慢，肿瘤体积及瘤重均明显减小；与U251组比较，U251-SR组肿瘤抑制率达85.6%；免疫组化染色显示，U251-SR组肿瘤组织Survivin蛋白表达明显下调，而U251组和U251-P组肿瘤组织Survivin蛋白表达无明显差异，均呈高表达。进一步采用免疫组化方法检测增殖细胞核抗原（PCNA）和八因子相关抗原（FⅧRAg）在移植瘤组织中的表达，计算各组肿瘤组织的增殖指数（PI）和微血管密度（MVD）后，研究人员又发现，与U251和U251-P组肿瘤相比，U251-SR组肿瘤PI和MVD明显降低。采用TUNEL方法检测凋亡细胞结果显示，与U251组和U251-P组肿瘤相比，U251-SR组肿瘤凋亡指数（AI）显著升高。