何金花, 刘 誉, 刘冠杰, 李琳娜, 李海成，王丽娟（暨南大学医学院生化教研室, 广东 广州 510632）

摘要:溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞质聚糖水解酶,它能专一性的作用于目的微生物的细胞壁而不能专一性的作用于其它物质。是一种无毒,无害安全性很高的盐基水解蛋白酶。被广泛应用于食品,饲料,医药等行业。本文重点介绍了溶菌酶在医药中的应用,并展望了其发展及应用前景。

1 溶菌酶的理化性质

溶菌酶由129 个氨基酸构成的单纯碱性球蛋白,化学性质非常稳定。当pH值为1.2～11.3范围内剧烈变化时,其结构几乎不变。在酸性环境中,溶菌酶对热的稳定性很强;当pH值为4～7100℃处理1 min仍能保持原酶活性;当pH值为3 时能耐100℃加热处理45min;在干燥条件下,溶菌酶可以长期在室温存放,其纯品为白色或微黄色。黄色的结晶体或无定形粉末,无臭,味甜。易溶于水,遭碱易破坏,不溶于丙酮和乙醚。

2 溶菌酶的药理作用

人溶菌酶具有多种独特而重要的药理作用。第一,抗菌消炎。细菌的细胞壁由胞壁质组成,胞壁质是由N- 乙酰氨基葡萄糖及N-乙酰胞壁酸交替组成的多聚物, 胞壁残基上可以连接多肽, 称为肽聚糖。多糖以直链形式存在,彼此邻近的多糖链之间可以通过肽链部分相互连接,从而形成三维结构。溶菌酶专一性地作用于肽聚糖分子的N-乙酰胞壁酸与N-乙酰葡萄糖氨之间的B-1,4糖苷键,结果使细菌细胞壁变溶菌酶在医药中的应用及其研究进展何金花, 刘 誉, 刘冠杰, 李琳娜, 李海成，王丽娟（暨南大学医学院生化教研室, 广东 广州 510632）得松驰,失去对细胞的保护作用,最后细胞溶解死亡;溶菌酶能直接杀灭革兰阳性菌,在分泌型免疫球蛋白补体的参与下,还能杀灭革兰阴性菌:如大肠埃希氏菌,此外它还与各种诱发炎症的酸性物质结合,使其灭活。并能增加抗生素和其他抗菌药物的疗效,改善组织基质的黏多糖代谢从而达到抗炎和修复的目的。第二,抗病毒。溶菌酶能与带负电荷蛋白的病毒直接作用, 并与DNA,RNA脱辅基蛋白结合,并形成复合盐,使病毒失活。第三, 增强免疫力。

溶菌酶参与机体内多种免疫反应,在机体正常防御和非特异性免疫中具有重要作用。它可改善和增强巨噬细胞吞噬消化功能, 降低细胞抑制剂导致的白细胞减少,结合细菌脂多糖,减轻内毒素作用, 以达到增强机体抵抗力的目的^[1] 。

3 溶菌酶在治疗五官科疾病中的应用

溶菌酶是人唾液中重要的抗菌成份,参与宿主对细菌的非免疫防御,调节口腔环境的稳态平衡,与抵抗口腔疾病的发生发展有一定的关系。

3.1 溶菌酶能抑制口腔龋齿的生长,抑制菌体糖酵解和产酸,所以多数学者认为溶菌酶对预防龋齿有一定作用。

kristala等^[3]用田鼠实验感染smutans建立模型,再用含溶菌酶的软膏涂布于牙齿表面,与空白对照作比较,发现溶菌酶有明显效果。

3.2 溶菌酶对表层性溃疡的治疗

效果比深层性溃疡效果好,对于轻型口腔溃疡,含服溶菌酶含片即可治愈。对于口炎型和重型溃疡患者,除了含服溶菌酶含片外,还需加用抗生素,维生素B 族口服药和静脉输液,以达到治愈目的。李瑛等^[4]用溶菌酶治疗口腔溃疡进行研究:入选患者中轻型者64例,口炎型者14例,重型者2例,结果轻型者3～5d 痊愈。口炎型者5～7 d痊愈,重型者10～12 d 痊愈。证明溶菌酶对各种类型五官科溃疡均有较显著的治疗作用。

3.3 近年来,各种原因导致真菌感染率呈不断上升趋势,白色念珠菌是主要致病菌。随着念珠菌株的增多,有关抗真菌药物耐药现象的报道也逐年增加,且有研究表明抗真菌药物有较大的副作用。目前临床上对于由白色念珠菌感染所致的小儿口腔疾病的治疗,常用抗真菌药物局部涂抹,一方面,不方便治疗;另一方面,口腔菌群失调得不到有效的纠正。因此韩剑星等^{[ 5 ]} 收集2004.5～2005.9年间山西医科大学附属第二医院口腔科及山西省儿童医院口腔科门诊及病房的小儿口腔白色念珠菌感染的病例,用咽拭子从其口腔采集标本,并采用科玛嘉(CHROMagar)显色培养基进行白色念珠菌的分离、培养和鉴定。药敏试验以复合溶菌酶、氟康唑和制霉菌素3种药物为试验药物,研究它们对所分离的白色念珠菌的抑菌效果,采用NCCLSM27-A^[5]微量稀释法测定药物的MIC值。

临床疗效观察采用随机单盲对照试验,将80例患儿病例随机分成两组:治疗组给予复合溶菌酶治疗,对照组给予制霉菌素治疗。三种药物的抗真菌药敏试验表明:复合溶菌酶、氟康唑和制霉菌素针对所分离白色念珠菌的最小抑菌浓度分别为2.03 μg/ml、3.19 μg/ml和6.03 μg/ml;白色念珠菌对复合溶菌酶的敏感性大于氟康唑和制霉菌素;临床疗效观察研究表明:复合溶菌酶治疗小儿口腔念珠菌病的有效率为97.5%,明显高于对照制霉菌素组; 复合溶菌酶组的治疗时间平均为6.46 d,明显低于对照制霉菌素组的13.0 d; 其研究结果表明:(1)白色念珠菌对复合溶菌酶的敏感性最高,大于氟康唑和制霉菌素。(2)复合溶菌酶用于治疗小儿口腔白色念珠菌病, 疗程短,治愈率高。(3)复合溶菌酶的抗真菌体外药敏结果与临床疗效一致,表明药物敏感性与临床疗效存在一定相关性。