3 　C 反应蛋白基因多态性与C反应蛋白水平相关

首先发现与血浆中的CRP 水平相关的多态性是Szalai 等在2002 年报道的内含子中的GT 重复序列[8 ] 。他们以系统性红斑狼疮病人为病例组,以正常健康人为对照组,检测他们的血浆CRP 水平和CT重复序列的重复次数。他们发现重复次数从9 次到25 次存在13 种,其中以16 次和21 次最多,大约占75 % ,并且对应于较低的CRP 水平。之后Brull 等[9 ]在2003 年测量了健康男性在大强度训练前和训练48 小时后以及接受冠状动脉搭桥术(coronary arterybypass graft ,CABG) 的病人手术前后的CRP 水平,并筛选了他们的CRP 基因。他们发现了两种新的单核苷酸多态性,一种是位于启动子区的rs2794521( - 717T/ C) ,一种是位于3’非翻译区的rs1130864 ( + 1444C/ T) 。其中rs2794521 与CRP 水平无关,而rs1130864 与CRP 水平相关,尤其是TT 纯合子者有着较高的CRP 基础水平。

Zee RY等[10 ]在2005 年报道了两种与CRP 水平相关的单核苷酸多态性,分别是位于启动子区的rs1800947 与位于内含子的rs1417938。在2006 年报道了一种位于启动子区的rs3091244 与CRP水平相关,这是一种比较少见的三等位基因单核苷酸多态性。Kathiresan S 等[11 ]在3301 个研究对象中筛查了13 种CRP基因单核苷酸多态性,最后发现rs3091244 与CRP 水平相关,带有T 等位基因者有着较高的CRP 水平。同年,AkihikoMorita[12 ]在健康的日本老年人中筛查了5 种CRP 基因单核苷酸多态性,也发现rs3091244 与CRP 水平相关,结果与Kathire2san S 等报道一致。还有一些CRP 基因多态性与血浆C 反应水平相关,如rs3093059 ,rs3093062 等,在此不一一细述,将其归纳为表1。

4 　C 反应蛋白基因多态性与冠心病

与CRP 水平相关的CRP 基因多态性较多,但是与冠心病等相关心血管疾病相关的CRP 基因多态性则少了很多,目前较为明确的有rs1800947、rs2794521 和rs3091244。

①rs1800947 :徐耕[23 ] 等2003 年应用免疫比浊法测量了汉族人群中hsCRP 的水平,然后用PCR2RFLP 的方法检测了rs1800747 基因多态性,结果发现该SNP 与CRP 水平相关,但是与冠心病不相关。2005 尚小明[24 ] 等也对CRP 基因的rs1800947 多态性进行研究,不同基因型之间的CRP 水平存在差异,GG型大于GC、CC 型,且冠状动脉狭窄程度与基因型相关,认为冠心病发病可能受该SNP 影响。Rizzello V[25 ]等于2007 也报道了该位点与心血管事件的联系。他们检测了105个心绞痛病人的rs1800947 多态性和CRP 水平,并对其进行了24 个月的随访,结果发现GG基因型的病人CRP 水平较低,与之前的报道吻合,并且发现在该位点上为C 等位基因的患者发生心血管事件的几率更小,但是应用了多变量回归分析后发现该位点不能作为冠心病的独立预测因子,最后他们认为该多态性有利于心绞痛患者的预后。Pai JK[26 ] 等人2008 报道他们对于32836 名女性和18225 名男性进行了2 到8 年的随访,这期间共有249 名女性和266 名男性患上了心梗或冠心病,他们在其余的研究对象中抽取了498 名女性和531 名男性作为对照,检测了六种CRP 基因多态性,发现rs1800947 无论在女性还是男性中都与冠心病相关,并且由rs1800947 和rs1205 所构成的CT 单元型(haplotype) 与冠心病显著相关。Akihiko Morita27等2006 年报道在日本人中CRP 多态性rs1800947 与缺血性卒中相关。他们研究了152 例缺血性卒中的病人和304 例患有高血压、高血脂、糖尿病但不患有缺血性卒中病人,检测了他们的CRP 基因,筛选了四种单核苷酸多态性,分别为rs1341665、rs1800947、rs1130864、rs1205 ,并分析了后三种单核苷酸多态性构建的单元型, 发现rs1800947 在缺血性卒中病人和其他病人中存在显著性差异,并且后三种单核苷酸多态性所构建的不同单元型中C2C2C与缺血性卒中相关,可作为缺血性卒中的预测因子。

②rs2794521 : Gu D[28 ] 2005 年报道在汉族人群中,rs2794521 与冠心病相关。他们随即检测了48 名冠心病患者,对患者的CRP 基因直接测序,筛查出了两种CRP 基因多态性rs2794521 与rs1205 ( + 2147A/ G) 。随后他们检测了619例男性冠心病患者及615 名健康男性,发现这两种多态性与CRP 水平没有关系,但是在冠心病患者中携带有- 717A 等位基因的比例显著高于正常健康人。当综合考虑了冠心病的其他危险因素后,运用多变量对数回归分析后发现带有-717A 等位基因的个体患有冠心病的风险是那些带有- 717G等位基因个体的6. 8 倍。这一结果也被Miller DT等人证实,他们在2005 报道rs2794521 与心肌梗死相关[18 ] 。

③rs3091244 :Kovacs[29 ]等2005 年应用变性高效液相色谱法对CRP 基因启动子区进行研究,发现rs3091244 与CRP 水平相关,且主要分布在冠心病患者中。Crawford DC 等[26 ]2006年报道rs3091244 与CRP 水平及冠心病都存在相关性。在最近的一次第三世界国家健康与营养普查中,他们检测了7159名受试者,发现了一些单核苷酸多态性及一些单核苷酸多态性所构成的单元型与CRP 水平相关,但是只有rs3091244 与冠心病相关,那些在该位点为AA 纯合子的个体更容易患有冠心病。Eklund C[30 ]等2008 年报道检测了2283 名年轻人的CRP 基因多态性、CRP 水平和颈动脉顺应性( carotid arterycompliance 、CAC , 一种动脉粥样硬化的亚临床指标) ,结果发现rs3091244 不仅与CRP 水平相关,而且与CAC 相关,在该位点为C 等位基因的个体具有较高的CAC 值,不易患有动脉粥样硬化,而为A 等位基因者则相反,与前面所述结论一致。

5 　问题与展望

冠心病被认为是一种炎症性疾病,血浆CRP 水平能够有效预测心血管事件。在众多影响CRP 水平的因素中,遗传因素能起到40 %的作用,故应引起人们的高度重视。现在已经知道CRP 基因序列的变化如各种基因多态性会影响到血浆水平,有些还与冠心病相关。在这里需要说明上文中所述的与心脑血管疾病相关的CRP 基因多态性只是用统计学分析后得出的结果,并不一定代表着两者之间必然存在着因果关系,故目前检测CRP 基因多态性尚未应用于临床。目前已有证据表明CRP 在心血管疾病的发生发展中起到一定的病理作用,所以有人推测上述的这些相关性是由于这些多态性尤其是启动子上的多态性作为一种顺式作用元件影响到了基因的表达,从而进一步影响到了心血管系统。在未来,如果能够进一步证实CRP 参与心血管事件的发生,并且证实了某一种或几种多态性参与调节了CRP 基因的表达甚至是影响了心血管疾病的进程,那么这些多态性与CRP 水平及心血管疾病就存在特异的相关性。这样的多态性位点可以用来进行基因诊断,提前预测心血管疾病,并且可以开发研制药物。所有的这一切,都有待于对其继续进行深入而有效的研究。