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HIV- 1B′特异性细胞毒性T细胞与疾病进展关系
www.yongyao.net  2009-12-9 14:11:05  来源:  责任编辑:
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1、2、3  CD4 + T 细胞绝对计数 将20μl CD4/ CD8/ CD3 三色单抗(美国BD 公司) 加入绝对计数管中,加入50μl 抗凝全血,室温避光15min , 加入免洗溶血素450 μl , 室温避光15min ,用流式细胞仪( FACSCalibor , 美国BD 公司) 检测,MUL TISET 软件进行自动分析,计算CD4 + 、CD8 + 、CD3 +淋巴细胞绝对值及相应比值等。
1、2、14  病毒载量测定 以200μl 血浆采用标准版模板制备法提取RNA ,用COBASAMPL ICOR 自动载量仪(美国Roche公司) RT - PCR 方法测定病毒载量。检测范围为400 ~750 000 拷贝/ ml 。

1、3  统计分析 采用SPSS 1310 统计软件进行统计分析。用Kruskal - Wallis Test 进行多组间的均值比较。用Spearman 相关系数比较反应强度及反应宽度与CD4 + T 细胞绝对计数及HIV - 1 RNA 病毒载量的相关性。

2  结 果

2、1  中国HIV - 1 感染者CTL 对不同HIV - 1B′Gag 多肽的应答(表1)  58 名患者中,7510 %识别p17 ; 8617 %识别p24 ;7510 %识别p2p7p1p6 ; 各患者对于多肽的识别情况不同,其中对p24 - 19 和p17 - 05 的识别百分率最高,分别为43110 %和41138 %。

表1  中国HIV- 1 感染者CTL 对不同HIV- 1B′Gag表位发生应答情况

2、2  中国HIV - 1 感染者CTL 识别HIV - 1B′Gag 表位的相关性 中国HIV - 1 感染者对HIV - lB′多肽发生特异性CTL 应答的反应宽度与病毒载量呈显著负相关( r = -0.374 , P = 0.004) ;与CD4 + T 淋巴细胞绝对计数呈显著正相关( r = 0.425 , P = 0.001) ; HIV - 1 感染者识别HIV - 1B′多肽的反应强度与病毒载量呈显著负相关( r = - 0.285 , P =0.030) ;与CD4 + T 淋巴细胞绝对计数呈正相关趋势( r =0.159 , P > 0.05) ,但差异无统计学意义。

2、3  不同进程HIV - 1 感染者CTL 反应宽度和反应强度比较(图1)  将全部病例按照疾病进展程度分为3 组:L TNP组、HIV 组、AIDS 组。经Kruskal - Wallis Test 显示,3 组之间识别HIV - 1B′多肽发生特异性T 细胞应答的反应宽度为L TNP 组> HIV 组> AIDS 组,其中长期不进展者反应宽度显著高于其他2 组( P = 0.001 , P = 0.005) ;3 组之间识别HIV- 1 多肽的反应强度亦为L TNP 组> HIV 组> AIDS 组,但差异无统计学意义。

图1  不同疾病进程HIV- 1 感染者识别HIV- 1B′Gag 表位反应宽度

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