2 　与入侵和毒力相关的弓形虫表面抗原蛋白

弓形虫表面抗原蛋白(Surface antigen ,SAG) 家族成员众多,与虫体入侵和毒力相关的蛋白主要有SA G1 ( P30) ,SA G2 ( P22) 和SA G3 ( P43) 。

SA G1 蛋白约30kD ,含336 个氨基酸残基,仅在速殖子表达。SA G1 也是虫体入侵细胞阶段主要的配体之一。用可溶性牛血清白蛋白2葡萄糖胺和SA G1 作用后, 可阻断SA G1 与MDBK细胞的结合,并呈现量效依赖性关系,表明在弓形虫入侵过程,SA G1 蛋白与宿主细胞的葡萄糖胺相互结合^〔27〕。SAG1 蛋白的基因结构与虫株的毒力密切相关。Windeck 发现,在强毒株的sag1 转录起始位点上游70bp 处的5 个完整的27 bp 的串联重复序列,而弱毒株仅有4 个。强度株弓形虫的SA G1 蛋白表达量较弱毒株高4 倍以上^〔28〕。

SA G2 和SA G1 共同作用影响虫体类锥体(couoid) 重新定向,在弓形虫感染宿主细胞的早期, SAG2 和SA G3 能协助SA G1 , 使虫体迅速入侵。SAG3 与SAG1 氨基酸序列比较,相似性为20 % , SA G3 基因敲除株对宿主细胞的入侵效率较野生株降低两倍。同时SA G3 基因突变株对急性感染小鼠的致死能力减弱^〔29〕。

3 　与弓形虫的入侵和毒力有关的其他蛋白酶

除了前面介绍的部分微线体和棒状体蛋白外,参与修饰和处理众多入侵和毒力相关蛋白前体的酶还包括:水解微线体蛋白跨膜结构域的微线体蛋白水解酶1 (MPP1) 和菱状体( rhomboid) 蛋白等。

另外,用环磷酸腺苷2依赖性蛋白激酶( PKG) 抑制剂三元代吡咯类药物处理虫体后,弓形虫对小鼠和细胞的入侵能力下降^〔31〕。Donald 等发现一个钙调蛋白样结构域蛋白酶(calmodulin2like domain protein kinase , CDPK1) ,同样能够被三元代吡咯所抑制, 而使虫体入侵宿主细胞的能力降低^〔32〕。

4 　结　语

弓形虫入侵宿主细胞并产生病理损伤,不是一个基因、一个蛋白质的功能,而是许多蛋白分子、多个调控机制,以及与宿主细胞内众多因子相互作用而完成的。现有的研究大多集中在入侵和毒力蛋白的发现,以及功能的初步验证上。只有少数深入到蛋白对宿主细胞信号转导的调控,和对宿主细胞下游反应的影响方面进行研究。随着对弓形虫功能基因组学和蛋白组学研究的深入,越来越多的入侵和毒力相关基因将被发现,大量蛋白的功能将被确定,弓形虫致病的分子机制也将被阐明;将为解决目前弓形虫尚无有效的预防和治疗性疫苗,易产生耐药性等问题带来希望。另外,以弓形虫作为模型,也将为研究复顶亚门其他寄生性原虫的入侵和毒力作用机制提供理论基础和技术参考。