3 讨论
3. 1 GM - CSF的临床新应用 自1985年Sieff等发表第1篇有关重组人GM - CSF ( recombinant human granulocyte macrophagecolony stimulating factor, rhGM - CSF)的文章以来,人粒细胞- 巨噬细胞集落刺激因子( rhGM - CSF)的临床用途逐渐引起了各位学者的兴趣,作为一个多潜能的造血生长因子,它的主要临床应用是促进骨髓造血,目前在临床上rhGM - CSF已成功地用于治疗恶性肿瘤放、化疗后所致的白细胞减少症,以及用于骨髓移植、再生障碍性贫血和某些存在白细胞低下的免疫缺陷性疾病的治疗等。近些年的研究发现, GM - CSF不仅能够作用于造血干、祖细胞促进骨髓造血,而且还作用于目前已知体内功能最强的抗原提呈细胞—树突状细胞,以促进免疫应答,调节免疫反应。另外,GM - CSF还作用于角质细胞、成纤维细胞、黏膜细胞等。近年来许多文献报道, rhGM - CSF不但能够用于防治白细胞减少症,而且在调节自身免疫、创伤愈合、抗病毒、抗真菌等治疗中也有着很好的疗效。
3. 2 GM - CSF作为致炎细胞因子,在多种自身免疫性和慢性炎症中起重要作用 在类风湿关节炎、肺慢性炎症性疾病、银屑病、多发性硬化症等动物模型中,应用GM - CSF抗体中和其作用,可以获得十分显著的疗效。并且患有以上疾病的GM - CSF基因敲除鼠其临床症状也得到了一定程度的改善。应用噬菌体表面的选择作用, Krinner等[ 10 ]得到了人类GM - CSF IgG1型抗体- MT - 203。低浓度的MT - 203可以和人类及猕猴高亲和力受体相互作用,从而降低了IL - 8的产生。在大肠杆菌和酵母菌中MT - 203可以中和人重组GM - CSF的作用,并且可以使肺上皮细胞分泌的GM - CSF产生糖基化作用。MT - 203可以降低人外周血嗜酸性粒细胞的活性,从而可以为肺慢性炎症性疾病提供新的有效的治疗方法。MT - 203的这种中和作用在37℃人血清中至少持续5 d。基于MT - 203的良好特性,人们已经将MT -203优化成了对人类自身免疫性和慢性炎症性疾病有免疫疗效的抗炎单克隆抗体。
3. 3 对恶性肿瘤放、化疗所致黏膜炎症、溃疡的作用 房彤等[ 11 ]将56例头颈肿瘤患者随机分为两组,治疗组32例,使用rhGM - CSF漱口液含漱( rhGM - CSF 100μg冻干粉末用1 ml蒸馏水溶解后加入200 ml生理盐水中) , 5次/d;对照组24例,常规处理。根据放射肿瘤治疗协作组(RTOG)急性放射性黏膜炎的分级标准进行临床评价。结果发现:治疗组Ⅲ、Ⅳ度急性放射性口腔黏膜损伤发生率18. 8% ( 6 /32) ,明显低于对照组( 75. 0% ,18 /24; P = 0. 0001) 。rhGM - CSF治疗放射性口腔黏膜损伤的有效率较对照组显著提高(87. 5%对45. 8% , P = 0. 0019) ,口腔黏膜溃疡平均愈合时间5 d。因此认为rhGM - CSF局部应用,对放射性口腔黏膜损伤有很好的治疗作用,可刺激表皮生长因子活性,促进溃疡早日愈合。朱雅群等[ 12 ]对31例出现3级放射性食管炎的患者口服5 ml注射用水+ 300μg rhGM - CSF +75%甘油20 ml的混合液分4次,每间隔1 h用药1次,连用5 d。结果发现, 31例中,放射性食管炎自3级退回至0～1级者13例( 41.94% ) ,退至2级者15例(48. 39% ) ,继续维持在3级者3例(9.68% ) ,总有效率为90. 32%。可见rhGM - CSF对放射性食管炎具有明显的治疗作用。由此可见, rhGM - CSF无论是采用皮下注射,还是采用溶于生理盐水漱口的方式,它均能有效地促进溃疡愈合,这也许是治疗恶性肿瘤放、化疗过程中产生的黏膜溃疡的不错的选择。
3. 4 对真菌感染的治疗作用 陈兴平等[ 13 ]通过体内和体外实验来研究rhGM - CSF与伊曲康唑联合抗白念珠菌的作用。体内实验:他们通过制备系统性白念珠菌感染小鼠模型,用不同剂量伊曲康唑单独或与rhGM - CSF联合应用于感染小鼠,观测其28d内的存活情况。体外实验:通过分离鼠外周血中性粒细胞及腹腔巨噬细胞,分别将其与不同浓度的伊曲康唑及伊曲康唑加rh-GM - CSF与白念珠菌共同培养,通过计数菌落形成单位( cfu)来判定伊曲康唑单独或与rhGM - CSF联合应用的抗白念珠菌效果。结果发现伊曲康唑1. 0 mg/kg与rhGM - CSF 25μg/kg联合应用能显著延长小鼠28 d内的存活期,效果与单用伊曲康唑2. 5mg/ kg相等,而rhGM - CSF 25μg/kg与伊曲康唑5 mg/kg联合应用时效果相当于单用伊曲康唑10 mg/kg。体外实验亦显示rhGM- CSF与伊曲康唑联用能减少白念珠菌数量。可见rhGM - CSF与伊曲康唑联合应用对抗小鼠系统性白念珠菌感染有较好的协同作用。
3. 5 在治疗病毒性肝炎方面的作用 在我国,由乙型肝炎病毒(HBV) ,丙型肝炎病毒(HCV)等所致的病毒性肝炎是发病率最高的传染病,因此对其进行有效防治就显得尤为重要。目前,对慢性肝炎的治疗仍以“干扰素”为首选药物,其作用机理是除直接抑制病毒复制外,还直接或间接地作用于细胞因子网络,调节宿主的免疫反应,从而减轻肝脏损伤的程度,防止疾病的进一步发展。但是,近些年的许多研究和观察表明,干扰素对病毒性肝炎的治疗效果不甚理想,尤其在治疗过程中产生的骨髓抑制等副作用,使得治疗不得不停止,因此寻找新的、更有效的药物已是势在必行。
邵春忠等[ 14 ]为了观察GM - CSF (GM - CSF)联合α - 干扰素(α - 1b INF)治疗慢性乙型肝炎患者对细胞免疫的影响及抗病毒治疗效果,设GM - CSF联合α - INF实验组和单用α - INF对照组,观察两组患者治疗前后外周血白细胞计数、单核细胞计数、粒细胞计数; T淋巴细胞亚群; 单个核细胞白细胞介素2 活性( PBMCIL2) ;单个核细胞白细胞介素2受体表达( PBMCIL-R) ,观察治疗后两组患者细胞免疫水平变化。实验组近期疗效与对照组比较无显著差异,而远期疗效显著优于对照组。加用GM -CSF治疗后患者上述各项指标较单用α - 干扰素组显著升高。联合治疗组HBV清除率优于单用α - 干扰素,联合治疗后显著升高患者血液中吞噬细胞数量,提高患者细胞免疫功能。陈焰等[ 15 ]采用放射免疫法检测各型乙型肝炎和肝炎后肝硬化患者与健康受试者血清GM - CSF浓度,常规检测外周血白细胞(WBC)计数, PCR法检测外周血乙肝病毒基因组(HBV DNA)含量。结果显示与正常人相比,慢性肝炎、肝炎后肝硬化患者血清GM -CSF水平、WBC水平下降( P < 0. 05) ;重型肝炎患者血清GM -CSF水平显著下降( P < 0. 01) ,WBC水平显著升高( P < 0.01) 。HBV DNA含量在急性肝炎、肝炎后肝硬化、慢性重型肝炎、慢性肝炎中依次升高。血清GM - CSF浓度基本与WBC的计数量变化一致。提示乙型肝炎患者血清GM - CSF水平对WBC水平的影响强于乙肝病毒,且有抗病毒作用。对于rhGM - CSF用于病毒性肝炎的治疗,目前已过渡到临床应用。有关rhGM -CSF通过调节机体的免疫应答而发挥抗病毒作用的研究报道在逐年增多,同时这些报道也表明了rhGM - CSF是一个安全、有效的免疫调节剂。
3. 6 GM - CSF在树突状细胞的分化增值过程所起的作用 Ojima等[ 16 ]研究发现GM - CSF在树突状细胞的分化增值过程中起关键性的作用。GM - CSF转导树突状细胞可以抑制其凋亡,从而延长其寿命。这种转导方法应用于免疫治疗可以取得如下疗效: ①减小腺病毒对树突状细胞的毒性作用。②延长被免疫树突状细胞的寿命。③减少外周淋巴结中树突状细胞的凋亡。
4 展望
rhGM - CSF是一个造血生长因子,它具有多种生物学活性。它不仅能够作用于造血前体细胞,促进其增殖、分化,而且也作用于巨噬细胞、树突状细胞、角质细胞、成纤维细胞等,发挥促进创伤愈合、调节免疫等作用。大量研究表明,粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM - CSF)以其显著的免疫调节作用和低毒性成为最具吸引力的免疫佐剂。
