2. 2. 2　K469E A →G多态性频率:研究发现此位点存在KK、KE、EE三个基因型, K、E两个等位基因,分布频率见表3。经Hardy2Weinberg定律检验证实达到遗传平衡。进展性肝病组(CH +LC)总KK基因型的频率(32.9% ) 显著高于SR 或AsC 组(分别为11.7%、11.1% ) ,差异有统计学意义(χ2 = 8.60, P < 0105;χ2 =5.07, P < 0.05) :其中CH组、LC组分别与SR比较,差异有统计学意义(χ2 = 6.82, P < 0.05;χ2 = 6.84, P <0.05) ; CH组、LC组分别与AsC组比较,差异有统计学意义(χ2 = 4.01, P < 0.05;χ2 = 4.07, P < 0.05) 。在进展性肝病组(CH +LC)总的K等位基因的频率(53.7% )亦显著高于SR或AsC组(分别为37.5%、37.5% ) ,差异有统计学意义(χ2 = 7.27, P < 0.05;χ2 = 5.23, P <0.05) :其中CH组、LC组分别与SR组比较,差异有统计学意义(χ2 = 5.30, P < 0.05;χ2 = 5.02, P < 0.05) ; CH组、LC组分别与AsC组比较,差异有统计学意义(χ2 =4.04, P < 0.05;χ2 = 4.04, P < 0.05) 。而CH和LC两组之间、AsC与SR两组间各差异均无统计学意义(表3) 。

表2　ICAM -1 G241R G→A位点多态性的基因型及等位基因频率分布

表3　ICAM -1 K469E A→G位点多态性的基因型及等位基因频率分布

3　讨论

乙型病毒性肝炎是一种多因素、多基因疾病,机体抗HBV的免疫反应是乙型病毒性肝炎的主要发病机制,免疫反应的强弱决定着HBV感染的不同临床结局。抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)是主要的效应细胞,可通过非细胞损伤机制(分泌细胞因子如: IFN-γ)和细胞损伤机制抑制HBV的感染,同时也启动了肝脏的免疫损伤,并通过多种途径募集大量非抗原特异性炎症细胞(如NK、Mφ、中性粒细胞、淋巴细胞等)聚集到肝脏,进一步扩大了肝脏的炎症反应,是乙型病毒性肝炎肝细胞损伤的主要机制^{[ 5 ]} 。而ICAM-1 是淋巴细胞功能相关抗原-1 (LFA-1、CD11a /CD8)和巨噬细胞抗原复合体(MAC-1、CD11b /CD8)的配体, ICAM-1 通过与其配体的相互作用,在机体抵抗感染和损伤的炎症和免疫反应中起着非常重要的作用。它能够介导细胞与细胞间的相互作用,特别是T细胞与靶细胞或抗原提呈细胞之间,介导白细胞的活化,白细胞与血管内皮细胞的黏附,炎症细胞向靶组织的游走等。而且ICAM-1介导的信号途径能够通过增加一些细胞因子和细胞表面蛋白的产生(如MHC-II、IL-1受体、VCAM-1及ICAM-1) , 促进抗原提呈^{[ 2, 4 ]} 。另外, Lebedeva 等[ 6 ] 认为ICAM-1还具有共刺激效应,能够使缺乏共刺激分子的CD8 + T淋巴细胞活化。

在正常情况下, ICAM-1主要分布于内皮细胞及免疫系统细胞(如淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞等)表面,在AsC患者的肝细胞表面也无表达,研究却发现在慢性乙型肝炎患者的肝细胞出现不同程度的ICAM-1 mRNA和ICAM-1的表达,其表达的量随着肝脏炎症程度的增加而增大,且ICAM-1表达越强,肝内HBcAg表达越少。并且可见到在炎症坏死的区域LFA-1阳性的淋巴细胞在表达ICAM-1的肝细胞周围大量聚集,部分LFA-1阳性的淋巴细胞与ICAM-1表达阳性的肝细胞紧密接触。从而认为ICAM21 可以促进淋巴细胞对HBV感染肝细胞的识别,有助于HBV 的清除, 缺乏ICAM-1会导致CTL敏感性下降,不能有效地杀伤肝细胞^{[ 1, 7 ]} 。另外,有研究发现ICAM21在肝纤维化或肝硬化新生的肝脏脉管系统、肝细胞、肝窦状系细胞高度表达,且分布在纤维间隔、炎症细胞和坏死丰富的区域,活化的肝星状细胞能通过增强的NF2κB 信号途径上调ICAM-1的表达,表达的黏附分子能够调节星状细胞膜受体与蛋白(包括细胞外基质) 的相互作用,若减少ICAM-1的表达则可以抑制肝纤维化^{[ 8, 9 ]} 。这些均进一步证实了ICAM-1在慢性乙型肝炎甚至肝硬化的发病机制中起着重要的作用。

ICAM-1是一种分子量为90～110 KD的单链跨膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族成员,其基因位于染色体19p3,由7个外显子、6个内涵子、1个2. 4 kb长的上游区和1. 5 kb长的3′非编码区组成。编码ICAM21的基因具有多态性,其中G241R和K469E是两个非常重要的多态性位点。目前已发现其与一些炎症和免疫相关性疾病有关,如原发性硬化性胆管炎、心脏移植后的血管病变等。

ICAM-1 G241R位点位于第4外显子区域,此位点G→A突变导致第三免疫球蛋白样区域甘氨酸变为精氨酸,此区域为B 淋巴细胞和树突状细胞的主要免疫表位,能够调节内皮细胞与免疫细胞间相互作用的强度^{[ 4, 10 ]} 。我们研究发现此位点GG基因型在慢性持续性感染组比SR组升高,但差异无统计学意义,而在AsC组、CH组、LC组之间GG基因型的分布频率却无显著差异。因而我们认为G241R位点的多态性与HBV不同临床结局之间无明显的相关性。