CD36识别、内吞ox-LDL,那么CD36是与何种ox-LDL 结合, 与ox-LDL 中的哪些成分结合呢?CD36可以与Cu2 +氧化的LDL,MPO /H2O2 /NO系统产生的ox-LDL,高脂血症的ApoE敲除小鼠分离而来的致粥样硬化“LDL ”结合。应用Cu2 + 氧化LDL主要是体外实验采用的方式,而在体内LDL被认为是通过MPO /H2O2 /NO 系统转变为致AS形式,诱导巨噬细胞泡沫化(Malle等与Carr等, 2000) 。早先的研究认为CD36识别ox-LDL 部分是氧化的脂质部分,与SR - A不同,后者识别的是ox-LDL氧化的脂蛋白部分( Terp stra 等, 1998 ) , Boullier 等(2000)随后提出ox-LDL 与CD36结合是由氧化磷脂介导的,其与脂蛋白的脂质和蛋白部分均相关,认为LDL在氧化过程中氧化磷脂的某部分与载脂蛋白共价结合, 也就是说ox-LDL 中的氧化磷脂与apoB共价结合成为CD36的有效配基。最近研究又发现氧化甘油磷脂胆碱家族( oxidized choline glycerophospholip ids oxPC)也是CD36 的高亲和力配体,参与CD36介导的氧化磷脂的吞噬和泡沫细胞形成,并已证实了4种主要与CD36结合活性相关的磷脂结构( Podrez等, 2002) 。

2. 3　CD36与AS形成　Nakata等通过尸检发现的胸主动脉AS斑块,脂质条纹,泡沫细胞都有CD36表达。进一步免疫组化显示CD36和SRA在AS斑块的不同部位表达不同, CD36阳性巨噬细胞- 泡沫细胞主要分布在粥样硬化斑块核,而SRA主要分布在斑块核外围,这种表达分布的不同,特别是富含脂质的巨噬细胞与CD36阳性巨噬细胞分布的一致提示了CD36在摄取ox-LDL,巨噬细胞转化为泡沫细胞中发挥作用,特别是在斑块形成的后期阶段(Na2kata等, 1999) 。通过动物模型发现CD36 及ApoE基因双敲除小鼠, 高脂餐喂养12 周动脉损伤较ApoE基因敲除小鼠减少70%以上(Kunjathoor等,2002) ,继续观察20及35周后,这种保护作用仍然存在^{[ 4 ]} 。那么这种保护作用是由于巨噬细胞CD36表达缺失带来的还是由于整个机体缺失CD36造成的呢? 进一步在此模型基础上,采用致死量放疗和干细胞移植的方法,观察到只缺乏巨噬细胞CD36表达可以明显减少AS的形成,主动脉树斑块面积减少88. 1%,由此可见巨噬细胞CD36缺失起到更主要的作用^{[ 5 ]} 。CD36的特异性配体EP80317则可以减轻ApoE基因敲除小鼠AS损伤的形成^{[ 6 ]} 。上述似乎都说明了CD36在促进AS形成中的作用,然而Moore等^{[ 7 ]}最近的一篇报道却质疑了在ApoE基因敲除小鼠CD36缺失的这种保护作用,他们通过对高脂血症CD36 /ApoE基因双敲除和SR-A /ApoE基因双敲除小鼠研究,显示出腹膜巨噬细胞脂质堆积明显减少,然而与以前的报道相违背的是它伴有主动脉窦斑块面积的增大。电镜和免疫组织化学检查发现斑块处大量巨噬细胞来源的泡沫细胞,这说明动脉内膜巨噬细胞摄取脂质缺乏CD36 及SR-A的存在, Febbraio小组对CD36 /ApoE基因双敲除小鼠的长期(20～35周)观察也证实了这点。这些研究结果的不一致,提示我们CD36在体内AS形成中的作用还有许多问题需要研究与探索,比如CD36在腹膜巨噬细胞与动脉内膜巨噬细胞作用可能不同,巨噬细胞内吞ox-LDL 形成泡沫细胞可能存在CD36和SR-A以外的途径。

3　CD36表达的调控

CD36在单核-巨噬细胞的表达是高度可控的,很多因素都可以上调CD36表达,如佛波酯,M-CSF,GM-CSF, IL-4,天然及修饰性LDL 等。过氧化物酶体增殖物激活受体PPARγ被认为是CD36 表达的关键调控因子。PPARγ激动剂如15 d-PGJ2,噻唑烷二酮类药物都可使CD36 表达增高(Nagy等和Tontonoz等, 1998) 。M-CSF通过上调PPARγ表达增加单核/巨噬细胞CD36的表达,白介素4 ( IL-4)诱导CD36的表达是PPARγ和12 /15脂氧合酶共同作用的结果(Huang等, 1999) 。

CD36的配基ox-LDL也明显上调其mRNA及蛋白的表达,进一步研究发现ox-LDL 是通过上调转录因子PPARγ,并提出了AS形成前期血管壁上ox-LDL 正反馈驱动自身摄入的假说(图3) ,经CD36摄入的ox-LDL在巨噬细胞内被切割部分酯链,形成9-HODE、13-HODE等产物,这些产物正是PPARγ的天然激动剂,激动了的PPARγ进一步通过与PPRE作用调控CD36转录、表达增加,从而导致更多的ox-LDL被摄入( Tontonoz等, 1998) 。但是,LDL的氧化程度不同对巨噬细胞CD36表达的影响不同,轻到中度氧化的LDL,而不是高度氧化的LDL可以增加CD36的转录,这也提示中度氧化LDL中的早期产物,如脂质氢过氧化物(它们会在高度氧化的LDL中降解)可能参与了CD36转录的调控( Kavanagh等, 2003) 。进一步从中度氧化的LDL 分离出亚油酸胆固醇酯氢过氧化物( linoleate cholesteryl ester hydroperoxides,CEOOH) ,发现CEOOH能够与中度氧化的LDL 同等程度的增加CD36 mRNA 及蛋白表达, 因此CEOOH可能是ox2LDL调控人巨噬细胞CD36表达的主要成分^{[ 8 ]} 。