2　NSA ID s对β淀粉样蛋白的作用

β淀粉样蛋白(β2amyloid pep tide,Aβ)是一种呈β折叠的纤维丝样蛋白,氨基酸序列分析发现其基本结构为含39243个氨基酸残基的多肽,由淀粉样前蛋白( amyloid p recursorp rotein,APP)水解而来,APP在体内有两种代谢途径: ①非淀粉源途径:在α分泌酶作用下,APP第16位氨基酸残基处发生裂解产生sAPPa,它具有维持突触可塑性和神经元保护功能; ②淀粉源途径: APP先后被两种酶水解。先在β分泌酶作用下,于APP氨基端裂解,产生包含完整淀粉样β蛋白序列的APP C端片段;再在γ分泌酶的作用下,于APP的近羧基端裂解产生完整的淀粉样β蛋白分子。γ分泌酶可水解Aβ39243间的不同肽键,产生多种Aβ片段。在正常生理条件下,Aβ是可溶的,它的产生、降解和清除是一个动态平衡过程。但在AD患者脑内,这种平衡被破坏,Aβ主要是Aβ40和Aβ42通过自身聚集形成难溶的沉淀,并生成老年斑,是发生AD的关键环节。虽然Aβ42的量较Aβ40少得多,但Aβ42以更加稳定的形式存在于老年斑和神经元纤维缠结中。由于Aβ有毒性,而sAPPa是保护性的,因此抑制β和γ分泌酶的活性或提高α分泌酶的活性可以减少Aβ的生成,有助于AD的治愈。许多研究表明NSA IDs可以通过影响APP加工或Aβ沉积过程等对AD起到改善。

2. 1　对APP加工过程的影响　Avramovich 等[ 8 ]观察到NSA IDs,如尼美舒利、布洛芬和吲哚美辛,可以明显增强SH2SY5Y和PC12细胞中α分泌酶活性,使sAPPα释放增加。还可以明显降低细胞APP全长蛋白质的水平,更促进了非淀粉源途径,减少淀粉样物的形成。而且,NSA IDs等引起的sAPPα释放增加是通过激活ERKMAPK信号级联反应。布洛芬、吲哚美辛和舒林酸可以优先降低培养细胞中Aβ42的产生,抑制率高达80%。这种作用并不是在所有NSA IDs中都出现,也并不是通过抑制COX活性而介导的。而且Aβ42分泌的减少伴随着Aβ38的增高,提示NSA IDs可以通过改变γ分泌酶识别和裂解的位点(由42位移至38位)而没有影响其它APP加工途径[ 9 ]。L leo等[ 10 ]也发现某些NSA IDs可以将APP的裂解产物变为更短、更小纤维化的形式,很可能是由于早老素21 ( PS1)构象改变对γ分泌酶的一种别构效应。Zhou等[ 11 ]发现Rho及其效应物Rho相关性激酶,可以调节Aβ42的生成数量, 而且只有具有Rho 抑制活性的NSA IDs才能减少Aβ42。如果给予选择性Rho 抑制剂Y227632,也可以降低转基因小鼠大脑中的Aβ42的水平。因此,Rho2Rock通路可以调节APP加工过程,某些NSA IDs可以通过抑制Rho活性减少Aβ42。

2. 2　对Aβ原纤维的影响　Hirohata等[ 12 ]利用荧光光谱学和电镜技术研究了体外几种NSA IDs对Aβ原纤维(β2amy2loid fibrils, fAβ)的形成、伸展和脱稳定化的影响。结果显示,所有研究的药物都剂量依赖性地抑制fAβ形成和伸展。而且,还剂量依赖性地使已形成的fAβ脱稳定化。这些分子的活性顺序如下:布洛芬≈舒林酸≥甲氯那酸钠盐>阿司匹林≈酮洛芬≥氟布洛芬≈双氯酚酸钠盐>萘普生≈吲哚美辛。

2. 3　对Aβ沉积的影响　Wilcock等[ 13 ]利用淀粉样前蛋白和早老素21 (APP + PS1)双重转基因小鼠,对其进行Aβ接种,给予NCX22216,同时给予Aβ接种和NCX22216, 3种方法处理9 mon,结果发现每种方法都能减少淀粉样蛋白沉积。其中NCX22216降低大脑皮质和海马的Aβ沉积分别为18%和20%。而且,同时给予Aβ接种和NCX22216并不具有协同作用,这说明Aβ的清除是有一定限度的,Aβ的生成和清除之间存在一个动态平衡。

2. 4　对α12抗胰凝乳蛋白酶的抑制　α12抗胰凝乳蛋白酶(ACT)不仅是一种急性期蛋白质,也是一种与淀粉样蛋白相关的分子,ACT过表达可以加速淀粉样病变。虽然ACT的功能还不是很清楚,多数证据都表明它可以抑制Aβ分解并促进Aβ在老年斑的持续沉积。AD 患者血浆和脑脊液中ACT水平都较常人高, ACT mRNA 也明显提高。Morihara等[ 14 ]给Tg2576小鼠6 mon的布洛芬,结果发现布洛芬给药组Aβ降低,ACT mRNA降低约20% ,白介素21β( interleukin1β, IL21β)水平降低达70% ,证明NSA IDs可以降低IL21β诱导的ACT过表达,从而改善Aβ。

2. 5　NSA ID s对Aβ的影响与炎症反应　NSA IDs对Aβ的影响与炎症反应是否存在因果相关性, 是否独立于其抗COX作用还存在争议。Quinn等[ 15 ]对Tg2576小鼠给予吲哚美辛治疗,发现前列腺素水平降低达90% ,而海马的Aβ仅降低了20%。数据上的这种不一致提示NSA IDs抗炎和抑制Aβ是两种独立的效应。而且给Tg2576小鼠炎性刺激物脂多糖( lipopolysaccharide, LPS) ,结果发现竟有降低Aβ水平的趋势,更证明了炎症反应和Aβ不存在因果相关性。Imbimbo等[ 16 ]对氟布洛芬的类似物CHF5022和CHF5074进行了研究,发现它们抑制Aβ42分泌的效能分别是左旋氟布洛芬的3倍和7倍,而且它们不抑制COX21和COX22的活性。而Iwata等[ 17 ]用治疗浓度的布洛芬和阿司匹林、吲哚美辛和COX21或COX22选择性抑制剂,都可以剂量依赖性地对抗体外培养的大鼠海马神经元中Aβ25235诱导的[ Cl- ]升高,还可以减弱Aβ25235诱导的谷氨酸毒性增加,并且NSA IDs对Aβ所导致损伤的保护作用是通过抑制神经元COX21和COX22。